血鈣濃度檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法
測(cè)定意義：血鈣幾乎全部存在于血漿中，所以血鈣要指血漿鈣。血漿鈣有離子鈣和結(jié)合鈣兩種形式，其中只有離子鈣直接起生理作用，它與結(jié)合鈣處于動(dòng)態(tài)平衡，并受血液PH 的影響。血鈣水平與多種重要的生理功能相關(guān)，過高或過低都會(huì)影響正常生理功能。本試劑盒用于檢測(cè)血液中游離鈣濃度。
測(cè)定原理：在強(qiáng)堿溶液中游離鈣與GBHA 反應(yīng)生成紅色鈣-GBHA 復(fù)合物在520 nm 有吸收峰；通過測(cè)定520 nm 吸光度計(jì)算游離鈣濃度。
自備儀器和用品：可見分光光度計(jì)、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿、無水甲醇、丙酮和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一液體×1 瓶4℃保存。
試劑二液體×1 瓶4℃保存。
試劑三液體×1 瓶（空瓶，試劑自備）。取 30 mL 試劑瓶，依次加入27 mL 無水甲醇和3 mL丙酮，蓋緊混勻即可。
標(biāo)準(zhǔn)液液體×1 瓶3μmol/L, 4℃保存。
血鈣濃度測(cè)定操作：
1.分光光度計(jì)預(yù)熱30 min 以上調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到520 nm蒸餾水調(diào)零。
2.空白管： 1mL 玻璃比色皿依次加入蒸餾水50μL試劑一200 μL混勻后再加入試劑二 200μL，混勻；最后加入試劑三 400μL，混勻；靜置5min 后于520 nm 測(cè)定吸光度A空白管。做一個(gè)空白管即可。
3.標(biāo)準(zhǔn)管： 1mL 玻璃比色皿依次加入標(biāo)準(zhǔn)液50μL試劑一200 μL混勻后再加入試劑二 200μL，混勻；最后加入試劑三 400μL，混勻；靜置5min 后于520 nm 測(cè)定吸光度A空白管。做一個(gè)空白管即可。
4.測(cè)定管： 1mL 玻璃比色皿依次加入血液樣品50μL試劑一200 μL混勻后再加入試劑二 200μL，混勻；最后加入試劑三 400μL，混勻；靜置5min 后于520 nm 測(cè)定吸光度A空白管。做一個(gè)空白管即可。
注意：加試劑三后應(yīng)該在30 min 內(nèi)完成該管的測(cè)定。
血鈣濃度計(jì)算：
血鈣含量(μ mol /dL 血液)= [C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)]×V 樣品總=300×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)
C 標(biāo)準(zhǔn)液：3μmol/mL； V 樣總樣品總體積，1dL=100 mL。
注意事項(xiàng)：宜早晨空腹采血并且采血后應(yīng)該盡快完成測(cè)定。
